Sett for rask bestemmelse av blodgrupper ERITROTEST ™ -GROUPOKART


Hovedkomponenten i settet er et kort med 5 brønner, på overflaten som tørre monoklonale antistoffer i COLICLON-serien påføres: Anti-A, Anti-B, Anti-AB og Anti-D C uper, samt et kontrollreagens. Et slikt sett tillater en uttrykkelig bestemmelse av blodgruppetilhørighet i henhold til ABO-systemet, så vel som dets Rh-tilknytning.

Settet inkluderer også:

- en steril scarifier for å ta blod fra en finger;

- engangspipette av plast for tilsetning av vann til brønnene;

- pinner for å blande blod i hullene (5 stykker);

- instruksjoner for bruk.

Hvert sett er pakket i en plastpose med en kort instruksjon på baksiden
applikasjon.

Holdbarheten til settene er 1 år. Kits selges i standardpakker på 5, 10 eller 50.

De viktigste fordelene med ERITROTEST ™ -GROUPOKART-settene er:

Mulighet for rask (3-4 min) bestemmelse av ABO og Rhesus blodgrupper;

Mulighet for testing i felt (i fravær av standardbetingelser for å skrive blod);

Komplett dokumentasjon av testing: etter bestemmelse kan du kutte av feltet med hull, og

lagre resten av kortet med de fullførte resultatene i medisinsk historie eller andre dokumenter;

Å beholde alle fordelene ved å jobbe med monoklonale antistoffer i ERITROTEST ™ -COLYCLONE-serien.

Sett for bestemmelse av blodgruppe og Rh-faktor

17. Lag et sett for å bestemme blodgruppen og Rh-faktoren.

tørr glassklie (standard plate) for å bestemme blodgruppen;

anti-A (rosa) og anti-B (blå) tsoliclones;

to pipetter for å ta tsolikoner fra hetteglass;

to glassstenger for å blande pasientens blod med tsoliclones;

en engangssprøyte (5-10 ml) med en nål for å ta blod fra pasientens vene;

legg 3 kuler fuktet med alkohol, 2-3 sterile servietter i et sterilt brett;

gummiturnikett for intravenøs punktering;

et tørt sentrifugerør der pasientens navn er tydelig merket med en glassopptaker;

skjema - henvisning til laboratoriet, hvor blodgruppen, Rh-tilknytning bestemmes på nytt av laboratorielegen, forseglingen og signaturen settes

Overhold alle reglene for intravenøse punkteringer, ta blod fra pasientens vene (minst 5 ml).

Anti-A og anti-B tsolikloner påføres tabletten eller platen en etter en stor dråpe (0,1) under de tilsvarende inskripsjonene: anti-A og anti-B.

Ved siden av dråpene av antistoffer påføres testblodet en liten dråpe (0,01 ml).

Etter blanding av reagensene og blodet med forskjellige glassstenger for anti-A og anti-B i forholdet 1:10, observeres agglutinasjonsreaksjonen i 2,5 minutter.

Leser resultatene etter 5 minutter mens du rører dråpene. (fra 3 til 5 minutter)

Resultatet blir vurdert av en lege.

For å utelukke autoagglutinasjon, som kan observeres i navlestrengsblodet hos nyfødte, i tilfelle å etablere blodgruppen AB (IV), er det nødvendig å gjennomføre en kontrollstudie: Bland en dråpe (0,1 ml) isoton natriumkloridoppløsning med en liten dråpe (0,01 ml) av testen blod. Det bør ikke være noen agglutinasjonsreaksjon.

A. Fyll nøye ut alle kolonnene i skjemaet - henvisninger til laboratoriet for å bestemme blodgruppen og Rh-tilhørigheten med legens signatur.

B. Lever en henvisningsskjema og et prøverør med pasientens blod til laboratoriet for grundig bestemmelse av pasientens blodgruppe og Rh..

Bestemmelse av Rh-faktoren ved bruk av et monoklonalt reagens (Tsoliklon anti-D Super)

En stor dråpe reagens (ca. 0,1 ml) påføres platen. Plasser en liten dråpe (0,01-0,05 ml) av testblodet i nærheten og bland blodet med reagenset. Agglutinasjonsreaksjonen begynner å utvikle seg på 10-15 sekunder, en tydelig uttalt agglutinasjon oppstår på 30-60 sekunder. (Rh-positiv, ingen agglutinasjon - Rh-negativ). Reaksjonsresultatene blir tatt i betraktning etter 3 minutter..

Etter å ha blandet reagenset med blod, anbefales det å riste platen ikke umiddelbart, men etter 20-30 sekunder, noe som gjør at en mer fullstendig agglutinering av store kronblader kan utvikle seg i løpet av denne tiden.

Sammensetning av sett og bestemmelse av gruppetilhørighet og blod Rh-faktor

Bestemmelse av blodgruppen ved bruk av anti-A og anti-B tsoliclones

1. Tilbered en plate, tsolikloner, glassstenger, en klokke, blodet som skal testes

1. Del platen i 2 deler med en stripe tusj

1. Påfør en dråpe anti-A og anti-B tsoliklon på en plate

1. Påfør en dråpe blod på en plate (ved siden av en dråpe tsoliclon), som hver er 10 ganger mindre enn en dråpe tsoliclon

1. Bland med forskjellige ender av glassstenger

1. Vrik i 2,5 minutter

1. Les resultatene av reaksjonen:

ingen agglutinasjon - 1 blodgruppe

agglutinasjon i anti-A - 2 blodgruppe

agglutinasjon i anti-B - 3 blodgruppe

agglutinasjon i begge dråpene - 4 blodgrupper

1. Forbered reagensglass, pipetter, saltvann (0,9% natriumkloridoppløsning), universal antiresusreagens, testblod

1. Påfør en dråpe av det universelle antiresusreagenset og en dråpe blod med samme størrelse på rørveggen

1. Wiggle i 3 minutter

1. Tilsett 3 ml. saltvann

1. Snu uten å riste

1. Les reaksjonsresultatene:

Tilstedeværelsen av agglutinasjon - det testede blodet er Rh-positivt

Mangel på agglutinasjon - det testede blodet er Rh-negativt

Sammensetning av sett og testing for individuell kompatibilitet mellom giver- og mottakerblod

ABO kompatibilitetstest (blodgruppe)

1. Tilbered en plate, donorblod i et hetteglass, mottakerserum i et prøverør, et ur og glassstenger

1. Påfør en dråpe av mottakerens serum og en dråpe av giverens blod fra hetteglasset til platen

1. Bland med glassstenger og rist i 5 minutter

1. Les resultatene av reaksjonen:

Tilstedeværelsen av agglutinasjon - blod er uforenlig ifølge ABO

Ingen agglutinasjon - blod er ABO-kompatibelt

Rh kompatibilitetstest

1. Forbered donorblod i et hetteglass, mottakerserum i et prøverør, et reagensglas, pipetter, polygyukinoppløsning (33%)

1. I et prøverør 2 dråper donorblod, 1 dråpe mottakerblod og 1 dråpe polyglucinoppløsning (33%)

1. Rist i 5 minutter

1. Tilsett saltløsning (2-3 ml)

1. Les resultatet av reaksjonen:

Tilstedeværelsen av agglutinasjon - blodet er uforenlig med Rh-faktoren

Ingen agglutinasjon - blod er Rh-kompatibelt

Sammensetning av sett med instrumenter for veneseksjon og kateterisering av subclavian venen

1. Forbered sterile gasbindkuler, anatomisk pinsett i et sterilt brett for bearbeiding av operasjonsfeltet; sprøyte med novokainoppløsning for lokalbedøvelse (0,25%); 2 sterile ligaturer; 1 sterilt kateter og steril skalpell; steril nåleholder med nål og sutur

1. Spør pasienten om toleransen for novokain

1. Operasjonen utføres under lokalbedøvelse i området til venen i albuebøyen (venen er operativt uthevet; 2 ligaturer bringes under venen; periferien av venen er bundet med den første ligaturen; venen er snittet og et kateter settes inn, som er festet med en ligatur; såret er sydd, et systemisk kateter er festet til det elastiske kateteret. for blodoverføring)

Subclavian venekateteriseringssett

1. Hudbehandlingsantiseptiske midler, sterile gasbindkuler på et sterilt brett

2. for anestesisprøyte med novokain 0,5% 10 ml

3. Engangs subclavian venekateter

Bruk av hansker og annet personlig verneutstyr når du håndterer blod

Før du arbeider med blod

1. Ta på deg briller, maske

1. Behandle hendene kirurgisk

1. Ta på deg sterile hansker

Hvis hanskene var i kontakt med det biologiske mediet til en pasient, er det uakseptabelt å berøre huden (såret) til en annen pasient eller utføre invasive manipulasjoner til en annen pasient.!

Etter å ha jobbet med blod

1. Senk hanskene i desinfiserende oppløsning i 1 time

1. Plasser i en spesiell pose (gul pose, gruppe B)

1. Send for resirkulering

Sentral veneinfusjonsbehandling

1. Klargjør en steril brett med en steril sprøyte, dressinger, et sterilt system for administrering av sterile oppløsninger, to flasker alkohol, pinsett, en stativ, 10% isotonisk natriumkloridoppløsning, heparinoppløsning.

2.Fyll dryppsystemet for sterile løsninger.

3. Samle en steril sprøyte, trekk opp 5 ml isoton natriumkloridoppløsning (for vask av kateteret).

4. Be pasienten om å vri hodet i motsatt retning fra det subklaviske kateteret og holde pusten.

5. Fjern hetten på det subklaviske kateteret.

6. Sett hetten i alkoholflasken.

7.Koble kanylen til den sterile sprøyten til det subklaviske kateteret, la pasienten puste.

8.Kontroller plasseringen av det subklaviske kateteret i venen (trekk sprøytestemplet mot deg), når det vises blod, injiser 2 ml isoton natriumkloridoppløsning..

9 be pasienten om å holde pusten.

10. Koble fra sprøyten og sett inn dråpekanylen i det subklaviske kateteret.

12.Juster et visst antall dråper.

13. Lukk sperren på IV etter injeksjon av den sterile løsningen i det subklaviske kateteret.

14. Be pasienten om å vri hodet i motsatt retning fra det subklaviske kateteret og holde pusten.

15. Fjern dråpekanylen.

16. Injiser 0,2 ml heparin i det subklaviske kateteret med 2 ml isoton natriumkloridoppløsning for å forhindre dannelse av blodpropp (ved slutten av infusjonen - heparinlås).

17.Lukk inngangen til det subklaviske kateteret med en plugg ved å trekke den ut av alkoholflasken med en pinsett. Fortsett å puste.

MERKNAD: Med langvarig intravenøs infusjon av sterile oppløsninger, er det nødvendig å med jevne mellomrom kontrollere plasseringen av det subklaviske kateteret i venen under røntgenkontroll..

Sentral venøs kateterpleie

1. Behandle huden rundt kateteret med en løsning av alkohol (70 grader), en løsning av strålende grønn (1%)

1. Gjør en sjekk for fravær av kinks, tettheten til gummiproppen

1. Kontroller at kateteret er åpent: koble en sprøyte med 20 ml. saltløsning, be pasienten om å holde pusten mens han inhalerer, trekk stempelet og blodet skal komme uhindret inn i sprøyten.

1. Endre infusjonssettet bare under innånding.

1. Etter hver infusjon, injiser 5000 enheter heparin og lukk godt med en propp

44. Påføring og fjerning av avbrutt sutur Påføring og fjerning av avbrutt sutur

1) Spør pasienten om legemiddeltoleranse

2) Forbered anatomisk tang, kirurgisk tang, nåleholder med nål, silke, saks på et sterilt brett

3) Behandle huden med en antiseptisk oppløsning (iodonat) ved hjelp av anatomisk pinsett

4) Ta tak i sårkanten med kirurgisk tang

5) Gjør en injeksjon, trekk deg tilbake 0,5 cm fra sårkanten

6) Den motsatte kanten av såret er sydd motsatt den forrige (trekker seg tilbake 0,5 cm)

7) Knyt knuter på den ene siden av såret

9) Neste søm i en avstand på 1 cm

1) Smør såret med jodonatoppløsning

2) Ta tak i knuten med anatomisk pinsett og trekk mot arr (ikke fra arr og ikke oppover, siden et ungt, skjørt arr kan spre seg)

3) Det kommer en hvit, umalt tråd fra huden; kryss den

Fjern tråden fra sømkanalen

4) Hvis det kommer en dråpe blod, pus eller lymfe, informer legen om at denne betennelsen

Bandasje pasienter med rene og purulente sår

Med rene sår

1. Forbered sterilt bandasjemateriale (servietter, turundas, kuler), anatomisk tang eller Billroth-tang, drenering av gasbind eller gassgas på et sterilt brett.

1. Ta på deg sterile hansker

1. Før du fjerner bandasjen (festet til såret), vanner du bandasjen med en løsning av hydrogenperoksid (3%)

1. Fjern bandasjen forsiktig

1. Skyll såret med en løsning av hydrogenperoksid (3%) (har et bredt spekter av antiseptiske egenskaper, inkludert ødelegger clostridia og sopp; eliminerer ubehagelig lukt fra såret og stopper blødning)

1. Påfør serviett fuktet med furacillin-oppløsning (1: 5000)

1. Påfør en steril bandasje

Med festende sår

Fremgangsmåten er den samme. Såret utføres i henhold til regelen om 3 faser av sårprosessen: hydrering, dehydrering og epitelisering.

1. I hydratiseringsfasen (det er mye pus i såret og uttalt hevelse i bløtvev)

Påfør dressinger med vannbaserte salver (disoler med antiseptiske midler), enzymer (trypsin, chymotrypsin, pepsin); fysioterapi er kontraindisert

2. I fasen av dehydrering (lite pus, ødem avtar)

Fettbaserte salver brukes. Forbindinger kan gjøres sjeldnere (en gang hver 2-3 dag). Fysioterapi mulig.

3. I fasen av epitelisering (sårheling er fullført)

Generelt: immunkorreksjon, avgiftning og stimulering av reparasjonsprosesser i såret brukes.

Såret toalettøvelse

Sårtoalettet utføres med friske sår (grunt, i tykkelsen på huden, som ved første spenning ikke etterlater et grovt arr). I andre tilfeller utføres PHO av såret.

1. Klargjør sterilt bandasjemateriale (servietter, turundas, kuler), anatomisk tang eller Billroth-tang, drenering av gasbind eller gassgas på et sterilt brett.

1. Ta på deg sterile hansker

1. Skyll såret med en løsning av hydrogenperoksid (3%) (har et bredt spekter av antiseptiske egenskaper, inkludert ødelegger clostridia og sopp; eliminerer ubehagelig lukt fra såret og stopper blødning) eller furacillinløsning (1: 5000)

1. Behandle kantene på såret med en løsning av alkohol (70 grader), smør med en løsning av strålende grønt (1%)

1. Påfør en steril bandasje eller lim BF-6

Bestemmelse av blodgrupper ved bruk av tsoliclones

Bestemmelse av blodgruppen ved hjelp av tsoliclones algoritme og tolkning av resultater

Bestemmelse av gruppen av erytrocytantigener og Rh-faktor har lenge vært en av de obligatoriske studiene for de fleste pasienter innlagt på sykehus. Det kan utføres på alle nivåer av medisinsk behandling, forutsatt at nødvendige reagenser og instrumenter er tilgjengelige..

Vanligvis utføres bestemmelsen av gruppen ved bruk av standard sera, selv om den konkurrerer med en annen metode som ligner på referansemetoden - bruk av tsoliclones.

Tsoliclon er et genetisk konstruert monoklonalt antistoff. Mus blir ofte brukt for å oppnå det - et spesielt antigen injiseres i dyret, og deretter oppnås en gnaver ascitesvæske, som inneholder disse antistoffene.

Morfologisk tilhører de klasse M immunglobuliner, dvs. antistoffer av den akutte fasen. Virkningsmekanismen deres skyldes dannelsen av et antigen-antistoffkompleks, hvor noen molekyler fungerer som antigen (i denne situasjonen proteiner som bestemmer blodgruppen og dens rhesus) som ligger på cellemembranen.

Hva er forberedelsene til tsoliclones

Foreløpig brukes 3 typer standard tsolikloner i laboratoriediagnostikk - anti-A, anti-B og anti-AB. Hver av dem reagerer med et spesifikt antigen for det, forårsaker utvikling av en immunrespons.

Disse stoffene er tilgjengelige i form av ampuller eller hetteglass som inneholder 5 eller 10 ml antistoffoppløsning. Alle har en bestemt farge, ifølge hvilken hver type bestemmes:

  • anti-A er farget rødt;
  • anti-B kommer i form av en blå løsning;
  • den kombinerte anti-AB (eller anti-D) tsoliclon har ingen spesifikk farge.

Tsoliklon anti-AB kan modifiseres og brukes til å bestemme Rh-faktoren.

Forskningsalgoritmen er ganske enkel, det kreves ingen spesiell forberedelse for studien fra pasienten.

Bestemmelse av gruppen kan utføres i naturlig blod med eller uten konserveringsmiddel. For forskning tas kapillærblod fra pasientens finger.

Det er viktig å overholde miljøforholdene for å oppnå pålitelig informasjon: analysen utføres i et godt opplyst rom med moderat fuktighet og en temperatur på minst 20 grader.

I tillegg bør du forsikre deg om at pasientens blod ble trukket riktig og at reagensene som er brukt, ennå ikke har utløpt..

På en spesiell plate (eller plate), i en avstand fra hverandre ved hjelp av en spesiell pipette, påføres 1 stor dråpe av hvert av antistoffene (for enkelhets skyld er det bedre å plassere dem slik - A, B, AB). Ved siden av hver dråpe tsoliclones er det nødvendig å plassere en dråpe av testblodet og gradvis røre dem mens du rister på tabletten..

Visuelt kan resultatene av studien bestemmes innen 5-10 sekunder etter analysestart. De såkalte "røde konglomeratene" - limte erytrocytter finnes i blodet som studeres. De dannes som et resultat av en agglutinasjonsreaksjon, dvs. i tilfelle når tsoliklon tilsvarer antigenet (inkludert i studien for Rh-faktoren). Hvis agglutinasjon ikke observeres, er det følgelig et avvik mellom de studerte antigenene og de tilgjengelige antistoffene..

Hvordan gjennomføres vurderingen av forskningsresultater og bestemmelse av gruppetilhørighet?

Som nevnt ovenfor bestemmes resultatet av studien av tilstedeværelsen av en agglutinasjonsreaksjon visuelt eller ved bruk av analysatorer:

  • hvis det ikke er tilstede i noen av dråpene, har blodet som studeres den første gruppen.
  • når det observeres i cellen der anti-A-tsoliclon er lokalisert, betyr det at det analyserte blodet inneholder dette antigenet. Dermed kan testblodet være enten den andre (genotype AA eller A0) eller 4 (AB) gruppene.
  • hvis agglutinasjon blir observert med anti-B-tsoliclon, er det testede blodet 3 (BB, B0) eller 4 grupper.

For å sjekke riktigheten av resultatene på platen, tilsettes en anti-AB-tsoliclon (som også har evnen til å bestemme Rh-faktoren). Det er til en viss grad en kontroll, siden det er ved tilstedeværelsen av agglutinater i det at korrektheten av analysen blir vurdert. Hvis reaksjonen har skjedd i alle celler, tilhører testprøven den 4. blodgruppen.

En situasjon er mulig når agglutinasjon observeres med anti-AB-tsoliclon, men i andre prøver er det ikke. I dette tilfellet kan vi snakke om en feil utført analyse, og bestemme gruppen og Rh-faktoren på nytt..

Hva du bør vurdere når du analyserer

For at analyseresultatet skal være så pålitelig som mulig, må en rekke forhold overholdes under prosedyren:

  • reagenser skal oppbevares på et kaldt sted ved en temperatur på + 2-8 grader i hetteglass med tett skrudd hette (i tilfelle brudd på lagringsreglene mister de raskt egenskapene);
  • for analyse er det umulig å bruke tsoliconer med utløpt holdbarhet (det er omtrent 30 dager) eller væsker som inneholder sediment, flak eller rusk;
  • studien er utført i et godt opplyst rom ved en lufttemperatur på minst +15 og ikke høyere enn +25 grader, og det skal ikke være smuss, støv og andre faktorer som kan forvride resultatet;
  • når du påfører biomateriale og reagenser på overflaten av tabletten, bør proporsjonene observeres nøyaktig - hvis det er for mye blod, er reaksjonen vanskeligere å spore, og i motsatt tilfelle (med et lite volum) vil det være for sakte;
  • bloddråper blandet med forskjellige typer tsoliclones bør ikke få lov til å smelte sammen - hvis dette skjer, blir studien gjentatt; Av samme grunn bør forskjellige pinner brukes til å blande reagenser med biomateriale.

Reaksjonens varighet bør være minst 3 minutter, og hvis resultatet er tvilsomt, bør observasjonstiden for biomaterialeprøver forlenges til 5 minutter. Men etter 10 minutter kan tørking av biomaterialet og naturlig utfelling av erytrocytter forekomme, så du bør ikke stole på en slik undersøkelse.

Reaksjon med standard erytrocytter

For å reagere med standard erytrocytter, kreves standard erytrocytter av tre blodgrupper: 0 (I), A (II), B (III).

Metode for reaksjon med standard erytrocytter

  1. Blod for forskning tas fra en blodåre til et prøverør, sentrifugeres eller lar stå i 30 minutter for å oppnå serum.
  2. Tre store dråper (0,1 ml) blodserum fra et prøverør påføres en merket plate, og ved siden av dem en liten dråpe (0,01 ml) med standard erytrocytter i grupper.
  3. De tilsvarende dråpene blandes med glassstenger, platen ristes, observeres i 5 minutter, NaCl 0,9% tilsettes dråpene med agglutinering og resultatet blir evaluert.

Evaluering av resultatene av reaksjonen med standard erytrocytter

Evaluer resultatene oppnådd med standard isohemagglutinerende sera og standard erytrocytter. Det spesielle ved resultatene av reaksjonen med standard erytrocytter - erytrocytter i gruppe 0 (I) betraktes som kontroll. Resultatet av kryssmetoden anses å være pålitelig hvis svarene om blodgruppen som studeres sammenfaller når de reagerer med standard isohemagglutinerende sera og med standard erytrocytter. Hvis dette ikke skjer, bør begge reaksjonene gjøres om.

Dekoding av resultatene

Resultatene kan observeres noen minutter etter at reagensene er kombinert. Fullstendig blanding av væsker indikerer fravær av en reaksjon, og agglutinering manifesteres ved utseendet av røde blodpropper i en klar løsning. Dette er røde blodlegemer som henger sammen når de kommer i kontakt med inkompatible monoklonale antistoffer. Deretter kan du tyde resultatene ved hjelp av en enkel algoritme:

Vi anbefaler også å lese: Hva er blodtype og Rh-faktor (tabell)

  • Gruppe 1 (0) - agglutinasjon er fraværende i begge dråpene, siden det ikke er agglutinogener på erytrocytter;
  • Gruppe 2 (A) - reaksjonen blir observert i den første dråpen med anti-A tsoliclon;
  • Gruppe 3 (B) - i den andre dråpen holder erytrocytter sammen ved kontakt med anti-B-reagenset;
  • Gruppe 4 (AB) - utseendet til et rødt bunnfall i begge dråpene.

Den fjerde blodgruppen betraktes som den sjeldneste, derfor blir analysen gjentatt når agglutinering vises i begge hullene. I tillegg må blod tilsettes til normal saltvann for å eliminere muligheten for farlige sykdommer. Hos en sunn person vil den ikke reagere på noen måte med saltvann, og erytrocytter vil ikke holde seg sammen.

Hva er analysen til

Gruppe- og Rh-faktor er genetisk bestemte egenskaper for blod som arves fra foreldre og forblir uendret gjennom en persons liv. Klassifiseringen av blodgrupper er basert på et visst sett med biokjemiske parametere og sammensetningen av antigener, og har 4 hovedgrupper. Transfusjon av en pasient med blod fra en inkompatibel gruppe eller med en annen Rh-faktor medfører en dødelig fare - immunforsvaret begynner å produsere antistoffer mot fremmede celler som angriper og ødelegger dem. Det er av denne grunn at det i situasjoner som medfører risiko for omfattende blodtap er nødvendig å nøyaktig bestemme tilhørigheten av blod og Rh-faktor både hos giveren og hos mottakeren..

Bestemmelse av blodgruppe og Rh-faktor

Nesten umiddelbart etter fødselen tas en blodprøve fra barnet for blodgruppe og Rh-faktor. Disse dataene forblir uendret for livet. Imidlertid husker ikke foreldrene alltid blodtypen og Rh hos babyen..

Derfor kan de ikke kommunisere dem når barnet vokser opp. Derfor tar mange selvstendig en blodtype og Rh-test. Moderne medisin tilbyr flere metoder for å bestemme blodgruppen og Rh-faktoren.

Her er de mest populære.

Sykloner for å bestemme blodgruppen og rhesus

Du kan finne ut blodgruppen ved hjelp av tsoliclones. Denne ganske nye metoden lar deg få nesten 100% pålitelige resultater..

Kolikloner er monoklonale antistoffer som syntetiseres gjennom genteknologi fra væske fra sterile mus. De brukes for å identifisere hvilken blodgruppe som er i henhold til ABO-systemet.

Denne typen analyser utføres i laboratoriemiljø. For å oppnå et pålitelig resultat må en rekke regler følges under studiet. Først og fremst bør lufttemperaturen i rommet der analysene utføres ikke være lavere enn +15 grader Celsius og over +25 grader Celsius..

Laboratoriet må også ha god belysning. Bare reagenser av høy kvalitet brukes til å utføre analysen. De skal være fri for uklarhet og flak. Det må brukes en egen pipette for hvert reagens for å unngå blanding.

Handlingsalgoritmen i dette tilfellet vil være som følger. På to motsatte sider av platen lages innskriftene anti-A og anti-B, under hvilke laboratorieassistenten plasserer 0,1 ml av den tilsvarende zoliclon. Du kan identifisere dem etter skygge.

Så for tsoliclon anti-A er den gul-rosa, og anti-B er blå. Deretter plasseres en dråpe blod under reagensen. Ved hjelp av en glassstang blandes begge stoffene.

Etter det tas en ren pinne, og denne manipulasjonen utføres med to andre stoffer..

Hvis det ikke er noen agglutinasjonsprosess, blir tsoliconen rød. Etter dette bestemmes blodgruppen:

  • Hvis agglutinasjon ikke går fra hver side av platen, er det ingen antigener A og B i erytrocyttene, derfor tilhører blodet den første gruppen.
  • Hvis agglutinasjon bare forekommer der anti-A-tsoliclon var tilstede, er bare antigen A til stede i de dannede blodcellene (erytrocytter). Derfor tilhører blodet den andre gruppen.
  • Hvis agglutinasjon bare forekommer der anti-B-tsoliclon var tilstede, er bare antigen B til stede i de dannede blodcellene (erytrocytter). Derfor tilhører blodet den tredje gruppen.
  • Hvis agglutinasjonsprosessen finner sted i begge tilfeller, inneholder erytrocyttene antigenene A og B. I en slik situasjon anbefales det å gjøre en ekstra analyse. For det tas en dråpe av pasientens blod og blandes med en isoton løsning av natriumklorid i en mengde på 0,1 ml. Hvis samtidig ikke observeres agglutinasjon, blir den fjerde blodgruppen bestemt.

Denne metoden kan også bestemme Rh-faktoren. Algoritmen vil være den samme som når du bestemmer blodgruppen.

En anti-D-tsoliclon er plassert på en hvit plate, og ved siden av er det en dråpe pasientens blod. Det skal være ti ganger mindre enn reagenset. Begge stoffene blandes, og i tilfelle agglutinering har begynt, blir en positiv Rh-faktor bestemt, hvis ikke, så er Rh-faktoren negativ.

Metodikk for å bestemme blodgruppen i henhold til ABO-systemet

Hvordan bestemme blodgruppen ved hjelp av ABO-systemet? Metoden for å gjenkjenne blodgruppen og Rh-faktoren ved ABO-systemet er ikke mindre populær enn den forrige. Studien er også utført i laboratorieinnstillinger. Teknikken for å utføre analyser ved hjelp av ABO-systemet er enkel.

Til dem tilsettes bloddråper, 10 ganger mindre i størrelse. Deretter blandes stoffene og det observeres en reaksjon. Etter 5 minutter kan teknikeren begynne å dekode. Agglutinasjon blir vurdert, der flak oppstår, og serumet blir fargeløst.

ABO-metoden gir følgende resultater:

  • det er ingen agglutinasjon hvor som helst, derfor har en person den første blodgruppen;
  • agglutinasjon forekommer i sera O og B, som betyr at blod er i gruppe 2;
  • agglutinasjon forekommer i sera O og A, som betyr at blod er i gruppe 3;
  • agglutinasjon forekommer i alle ABO-sera, noe som betyr at det er behov for ytterligere forskning der serum vil bli brukt til å bestemme den fjerde gruppen. Hvis agglutinasjonsprosessen i dette tilfellet ikke fant sted, tilhører blodet som studeres gruppe 4.

Blodtypesett

Indikasjoner: behov for blodtransfusjon, forberedelse til kirurgi.

Forbered: standard plate med fordypninger; et sett med glassstenger; isotonisk natriumkloridoppløsning; et sett med hemagglutinerende sera 1, 2, 3, 4 grupper av to serier; pipetter; undersøkt blod tatt fra en vene eller finger; klokke; brett; hansker; beholdere for avfallsmateriale; beholdere med desinfeksjonsløsninger.

Forberedelse for manipulasjon:

  1. Sykepleieren er fullt forberedt på å utføre manipulasjonen: hun er kledd i dress (kappe), maske, hansker, hette, skiftbare sko.
  2. Sjekk kvaliteten på standard hemagglutinerende sera ved: fargemarkering, utseende (lys, gjennomsiktig); emballasjens sikkerhet, tilstedeværelsen av en korrekt utformet etikett.
  3. Forbered alt du trenger for å utføre manipulasjonen.

Utfører manipulasjon:

- på en hvit plate, i henhold til betegnelsen, påfør suksessivt en dråpe serum 1, 2, 3 grupper på to serier. Senk hver pipette umiddelbart i samme ampulle (hetteglass) som de ble tatt fra;

- bruk en glassstang, påfør en dråpe av testblodet ved siden av depresjonene (6 depresjoner). En dråpe blod bør være 10 ganger mindre enn en dråpe serum;

- merk tiden og bland blodet med serum 1 g med en ren, tørr glassstang, deretter 2 g med en annen stang. etc. i alle fordypninger;

- som begynnelsen av agglutinering, men ikke tidligere enn 3 minutter, tilsett en dråpe isoton natriumkloridoppløsning til de dråpene der agglutinasjonsreaksjonen skjedde for å utelukke falsk agglutinasjon og fortsette observasjonen i 5 minutter.

Evaluering av resultatene:

a) med en positiv reaksjon, vises de minste kornene som er synlige for øyet i blandingen, bestående av limte erytrocytter. Små korn smelter sammen til store korn, og noen ganger til flak, mens mysen blir misfarget;

b) i tilfelle en negativ reaksjon, forblir væsken jevnt farget rosa;

c) 4 kombinasjoner av positive og negative reaksjoner er mulige:

1. Hvis det ikke er agglutinasjon i noen av cellene, så er blodet i gruppe I (0).

2. Hvis agglutinasjon er i de første og tredje cellene, så er blodet i gruppe II (A).

3. Hvis agglutinering er i første og andre gruppe, så er blodet fra III (B) -gruppen.

4. Hvis agglutinasjon i de første, andre, tredje cellene, så blodet fra IV (AB) -gruppen.

For å eliminere feil, sjekk blod med serum fra gruppe 4, der agglutinering ikke skal være.

Slutt på manipulasjon:

  1. Fjern hanskene, legg dem i en desinfiserende løsning.
  2. Vask hendene, tørk med et håndkle.

Merk: Blodgruppebestemmelse utføres i et rom med god belysning ved en temperatur på 15 - 25 0 С.

Bestemmelse av blodgruppe

I 1901 oppdaget den fremtredende forskeren Karl Landsteiner blodgrupper og la grunnlaget for moderne transfusiologi. Forskeren identifiserte tre grupper basert på forskjellige varianter av agglutinasjonsreaksjonen av erytrocytter og blodserum. Materialet for studien ble hentet fra ansatte i vårt eget laboratorium. Landsteiners studenter, Decastello og Sturley, oppdaget en fjerde gruppe noen år senere, men anså den tvilsom og ekskludert fra forskningsresultatene. I 1906 bekreftet en psykiater fra Praha Jan Janski eksistensen av AB (IV) -gruppen. Publikasjonen av studien i en lokal publikasjon gikk nesten ubemerket. I 1910, etter gjenoppdagelsen av Mosses fjerde gruppe, ble Jan Jansky tvunget til å bevise oppdagelsens overlegenhet. En tsjekkisk forsker foreslo en digital betegnelse på blodgrupper: I, II, III, IV.

I transfusjonsmedisin kalles forskjellige kombinasjoner av erytrocytantigener blodgrupper. Antigener er genetiske trekk: de arves fra foreldrene og forblir uendret gjennom hele livet. I 1980 utviklet International Blood Transfusion Community en numerisk terminologi for antigener av røde blodlegemer. Tildelt 23 blodgruppesystemer, inkludert 194 antigener. Nummereringen tilsvarer i de fleste tilfeller rekkefølgen på deteksjonen. Antigenene som inngår i hvert av de 23 systemene er kodet med et sekssifret tall: de tre første sifrene er systemnummeret, de resterende tre indikerer spesifikkheten til antigenet i systemet.

System nr.NavnBetegnelseNavn på generKromosomalisering
001AB0AB0AB09q34.1-q34.2
002MNSMNSGYPA, GYPB, GYPE4q28-q31
003PP1P122q11.2-qter
004RhRHRHD, RHCE1p36.2-p34
005LutherskLULU19q12-q13
006KellKELKEL7q33
007LewisLEFUT319p33
008DuffyFYFY1q22-q23
009KiddJKJK18q11-q12
010DiegoDIAE117q12-q21
011YtYTSMERTE7q22
012XgXGXGXp22.32
013SciannaSCSC1p36.2-p22
014DombrockGJØREGJØREukjent
015ColtonCOAQP17p14
016Landsteiner-WienerLWLW19p13.2-cen
017Chido / RogersCH / RGC4A, C4B6p21.3
018HhHFUT119q13
019KxXKXKXp21.1
020GerbichGEGYPC2q14-q21
021CromerCROMDAF1q32
022KnopperKNCR11q32
023IndiskICD4411p13

AB0 blodgruppesystem

Gruppetilhørighet i henhold til AB0-systemet

AgglutinogenerAgglutininer
0α og β
ENβ
Bα
ABNei
  • 0 (I): antigenene A og B er fraværende, antistoffer α og β påvises (35 - 40% av verdens befolkning);
  • A (II): antigen A og antistoffer β er til stede (35%);
  • B (III): Agglutinogen B og Agglutinin α ble funnet (15 - 20%);
  • AB (IV): tilstedeværelse av agglutinogener A og B, fravær av agglutininer α og β (5-10%).

Når vi beveger oss fra vest til øst for Eurasia, reduseres deteksjonshastigheten for antigen A, og antigen B øker. Antigen 0 er sjelden i Asia, men er utbredt blant urfolkene i Sør-Amerika, Polynesia og Australia. Årsaken er epidemier av smittsomme sykdommer.

Resultatet av blodtyping er registrert i medisinsk historie eller i giverkortet. Transfusjonslegen angir dato og tegn.

I noen tilfeller observeres en mild agglutinering av erytrocytter under typing. Den utilstrekkelig uttalte reaksjonen forklares med tilstedeværelsen av svake varianter av antigenene A og B. Den største kliniske betydningen presenteres av undergrupper A1 og A2. Svake varianter ble først oppdaget i 1911 av forskerne Dungern og Hirszeld. Senere i 1930 foreslo Landsteiner og Levine undergruppenavnene - A1 og A2. EN2 forekommer opptil 20% i gruppe A og opptil 35% i gruppe AB. Ansiktsserum fra blodprøver A2 kan inneholde anti-A1-antistoffer: i 2% av tilfellene i gruppe A.2 og 30% i A.2B. Anti-A-antistoffer1 er farlige på grunn av agglutinering av erytrocytter i gruppe A..

Metode for å bestemme blodgrupper A2 og A2B

Erytrocytt påvisningshastighet A2 varierer betydelig avhengig av reagensene som brukes. Her er en sammenligning av forskningsresultatene når du bruker forskjellige metoder for å bestemme blodgrupper A2 og A2B.

  • Anti-A1 (lektin, fytohemagglutinin). Diagnosticum tydelig (på +++ / ++++) agglutinerer A1 erytrocytter umiddelbart etter blanding med prøven. Agglutinerer ikke A2 eller forårsaker mindre agglutinasjon i femte minutt eller senere.
  • Standard isohemagglutinerende serum.
  • Anti-A og anti-AB sykloner.
  • Tsoliklon anti-A svak.
Prøver analysertBlodgruppe A (II)Blodgruppe AB (IV)
Prøver analysertGruppe A2 (II) i%Prøver analysertGruppe A2B (IV) i%
Anti-A1 (lektin, fytohemagglutinin)159214.735723.5
Sykloner: anti-A, anti-AB35992,1 *3577,03 *
Tsoliklon anti-A - svak35874,5 *35711,2 *
Standard isohemagglutinerende serum159217.434434.2

Merk: * - agglutinasjon er svak, det er små agglutinater på rosa bakgrunn.

Den høyeste forskningsnøyaktigheten er gitt av Anti-A1 (lektin, fytohemagglutinin). Testen anbefales for påvisning av antigen A-undergrupper hos barn under to år. Årsaken er fysiologisk umodenhet av erytrocytter hos nyfødte, noe som fører til feilaktige resultater av en studie med standard isohemagglutinerende sera.

I 1930 oppdaget Landsteiner og Levine undertypen Aint: en mellomvariant mellom A.1 og A2. Dette antigenet er karakteristisk for negroider og når 8,5% hos personer med blodgruppe A. Hos kaukasiere ble Aint observert hos bare 1% av personer med den andre blodgruppen. I ekstremt sjeldne tilfeller mangler en person alle antigener i AB0-systemet. Bombay-fenotypen skyldes hh-genotypen. I fravær av H-antigen finnes anti-A- og anti-B-antistoffer hos personer i denne kategorien.

Metode for å bestemme blodgrupper

Algoritme for å bestemme blodgruppen med hemagglutinerende sera

For å bestemme AB0-blodgruppen ved en direkte metode, brukes to serier med standard isohemagglutinerende sera. Forbered to batcher av sera i tre grupper med en titer på 1:32 eller høyere. Bruk en separat merket pipette for å tegne hvert serum. Forbered AB (IV) serum for kontroll.

  1. Sørg for god belysning og lufttemperatur 18 - 25 ° C.
  2. Merk platen: 0 (I) - venstre, A (II) - midt, B (III) - høyre. Øverst i midten angir du donorens navn eller antall blod som blir analysert.
  3. Påfør 1-2 dråper (ca. 0,1 ml) serum i brønner i to rader i henhold til platemerket.
  4. Plasser en liten dråpe erytrocytter som skal undersøkes ved siden av serumdråpene med en pipette eller en glassstang. Volumet av serumet bør være omtrent 10 ganger volumet av den erytrocytholdige væsken.
  5. Rør dråpene i brønnene med en pinne.
  6. Rist tabletten lett for å få raskere reaksjon.
  7. Etter tre minutter, tilsett en dråpe NaCl til brønnene i platen der agglutinering har begynt. Vent to minutter til.
  8. Evaluer reaksjonsresultatene i løpet av fem minutter etter fem minutter. I tilfelle mild agglutinasjon, tilsett en dråpe NaCl.
  • En negativ reaksjon i tre brønner indikerer fraværet av antigener på erytrocyttene i testprøven. Blod tilhører gruppe 0 (I).
  • Agglutinasjon i brønner med serum 0 (I) og B (III) indikerer tilstedeværelsen av agglutinogen A og tilhører gruppe A (II).
  • Utbruddet av en reaksjon med sera 0 (I) og A (II) indikerer tilstedeværelsen av antigen B og gruppe B (III).
  • Reaksjonsresultatene i alle brønner indikerer tilstedeværelsen av agglutinogener A og B og tilsvarer den fjerde gruppen AB (IV).

I sistnevnte tilfelle bør du sørge for at det ikke er noen uspesifikke reaksjoner: påfør 2-3 dråper av den tilsvarende serumgruppen AB (IV) på platen og tilsett en dråpe erytrocytter som skal analyseres. Rør om væskene og vurder resultatet etter fem minutter. Fraværet av agglutinasjon indikerer tilhørighet til AB (IV) -gruppen, tilstedeværelsen er et tegn på en uspesifikk reaksjon. I dette tilfellet, så vel som i tilfelle mild agglutinasjon, gjenta studien med andre serier.

Teknikk for å bestemme blodgruppen med tsoliclones

Monoklonale antistoffer mot erytrocytantigener har erstattet isohemagglutinerende sera. Én gruppe anti-A, anti-B, anti-AB reagenser er tilstrekkelig for hver typing. Innføringen av monoklonale reagenser har signifikant forenklet og standardisert metoden for å bestemme AB0-blodgruppen. Her er en rask trinnvis guide til å utføre forskning på et nettbrett.

  1. Gi god belysning. Arbeid ved romtemperatur.
  2. Forskningsobjektet er erytrocytholdige medier.
  3. Merkeplate brønner: anti-A, anti-B, anti-AB eller bruk en plate med merket klistremerke.
  4. Tilsett ca. 0,1 ml av det passende monoklonale reagenset i hver av de tre merkede brønnene.
  5. Tilsett ca. 0,03 ml analyserte erytrocytter ved siden av hver dråpe diagnosticum.
  6. Bland reagens med erytrocytter i brønner med separate individuelle glassstenger.
  7. Rist tabletten i omtrent tre minutter.
  8. Sjekk for agglutinasjon i brønnene.

Vanligvis oppdages en reaksjon allerede i de første sekundene etter blanding. Samtidig kan svake varianter av antigenene A og B gi en senere agglutinasjon.

Bestemmelse av blodgruppen ved den indirekte metoden: en handlingsalgoritme

Metoden for å bestemme blodgruppen er basert på interaksjonen mellom erytrocytter fra forhåndstypede individer i gruppe 0, A, B eller en blanding av erytrocytter fra flere enkeltgruppedonorer med isohemagglutininer α og β i det studerte serumet..

Bruk tørre, rene pipetter med hvert typeagens. Skyll omrøringspinner og pipetter i 0,9% NaCl-løsning.

  • Klargjør en tallerken eller plate. Gi god rombelysning.
  • Samle 3-5 ml blod uten stabilisator i et prøverør. La mysen sitte i 1,5 - 2 timer ved romtemperatur.
  • Vask test erytrocytter i 0,9% saltvann. Forbered en 5% slurry.
  • Merk delene på tabletten: 0 (I), A (II), B (III).
  • Plasser 2 dråper (ca. 0,1 ml) av det analyserte plasmaet i hver av de tre brønnene.
  • Tilsett ca. 0,03 ml testrøde blodlegemer i hver brønn.
  • Bruk separate pinner og bland typede røde blodlegemer med serum.
  • Rist tabletten forsiktig i 5 minutter.
  • Utfør en visuell vurdering av agglutinasjonstestresultatene i overført lys.

Konklusjon om gruppetilhørighet

Plasmaresultater med standard erytrocytterGruppetilhørighet
0 (I)A (II)B (III)
-++0 (I)
--+A (II)
-+-B (III)
---AB (IV)

+ - tilstedeværelse av agglutinasjon, - - negativt resultat av reaksjonen.

  • 0 (I): reaksjon i brønn A (II), B (III) (α- og β-antistoffer påvist).
  • A (II): agglutinasjon med erytrocytter B (III) (β-agglutininer påvist).
  • B (III): agglutinasjon i hull A (II) (α agglutininer bestemt).
  • AB (IV): ingen reaksjon resulterer i alle brønner (ingen antistoffer påvist i plasma).

Rhesus-systemet

Levine og Stetson oppdaget Rhesus-antigener i 1939. Forskere studerte årsakene til utviklingen av hemolytiske reaksjoner hos kvinner under fødsel under transfusjoner til kvinner identiske i AB0-, MN- og P.-systemene av erytrocytter fra ektemenn. Et år senere produserte Landsteiner og Wiener antistoffer ved å immunisere kaniner med erytrocytter fra rhesusaper. Antistoffene kalles anti-RH-antistoffer. De resulterende agglutininene inngikk en agglutinasjonsreaksjon med erytrocytter av rhesusaper og med erytrocytter på 85% av hvite New Yorkere. Antigenet som forårsaket dannelsen av antistoffer kalles RH-faktor (D-faktor).

I sjeldne tilfeller inneholder menneskelige røde blodlegemer ikke noe rhesusantigen. Fenotypen betegnes Rhnull. Gen Xro i dette tilfellet presenteres det i homozygot form og hemmer produksjonen av alle antigener. Rh fenotypenull viser ikke agglutinogen aktivitet, men har evnen til å overføre antigener ved arv.

Blant europeere er hyppigheten av Rh-positiv for D-antigenindivider 85%. Membranen til røde blodlegemer inneholder vanligvis rundt 10 000 - 30 000 D. molekyler. Det er to spesielle typer D-positive personer: D u (svak) og D delvis (delvis). Immunsystemet Du og D delvis er i stand til å produsere anti-D-antistoffer.

Svakt antigen forekommer hos 1,5% av Rh-positive individer og er preget av et lavt antall (100-500) D-molekyler på membranen. Det er immunogent for Rh-negative individer. I dette tilfellet kan transfusjon av D-positive erytrocytter hos pasienter med svak D forårsake sensibilisering av giverens blodceller. Erytrocytter med Du er svakt agglutinert eller inngår i det hele tatt ikke en direkte agglutinasjonsreaksjon med komplette anti-Rh-antistoffer. Bestemmelse av Rh-tilknytning utføres i en indirekte antiglobulintest. Bærere D u regnes som Rh-positive givere og Rh-negative mottakere.

Del D er mangelfull i en eller flere epitoper av proteinmolekylet. Immunsystemet til mennesker med D delvis er i stand til å produsere antistoffer mot de manglende epitopene. Syv grupper av personer skiller seg ut mellom bærere av et delvis antigen. Den største kliniske betydningen er transport av D VI (kun epitop Z er til stede): eierne av denne kategorien produserer antistoffer mot det uendrede antigenet og mot de delvise antigenene D I - D V, D VII. Teknikken for å bestemme Rh-faktor D VI består i sekvensiell bruk av to diagnoser: monoklonale IgM anti-D antistoffer (anti-D-Super eller Anti-D IgM tsoliklon) og anti-D polyklonale eller monoklonale IgG antistoffer (standard universalreagens eller anti-D-tsoliclon -D). Et negativt resultat av reaksjonen ved første og et positivt resultat i andre fase av studien indikerer påvisning av D VI. Vanligvis tilsvarer kategori D VI genotypen CcDee. Gravide kvinner med D VI når de bærer et foster med full D, foreskrives anti-rhesus immunglobulin.

Antistoffer mot Rhesus-antigener er immun. Oppstå på grunn av isosensibilisering. Spesifisiteten bestemmes av antigenene som provoserer dannelsen av antistoffer. Isoler komplette og ufullstendige antistoffer.

Komplett er IgM-antistoffer. De har høy molekylvekt og finnes sjeldnere enn ufullstendige antistoffer. Kunne agglutinere Rh-positive erytrocytter. Er mindre viktig for transfusjoner.

Ufullstendig tilhører overveiende IgG-klassen. De er festet på overflaten av Rh-positive erytrocytter uten dannelse av agglutinater. Binding av blodceller utføres i nærvær av kolloidale oppløsninger og proteolytiske enzymer eller etter behandling med antiglobulinserum. De har lavere molekylvekt sammenlignet med komplette antistoffer. Kunne krysse morkaken. Under sensibilisering produseres først komplette antistoffer, deretter produseres ufullstendige (IgG immunglobuliner) antistoffer i større grad.

Teknikk for å bestemme Rh-faktoren ved bruk av anti-D-Super tsoliklon

Tsoliklon Anti-D-Super er et komplett anti-D IgM humant antistoff. For å oppnå pålitelige resultater, må den analyserte prøven inneholde et tilstrekkelig antall røde blodlegemer..

  1. Gi god belysning og romtemperatur i rommet.
  2. Plasser en stor dråpe (ca. 0,1 ml) Anti-D IgM på platen.
  3. Plasser en liten dråpe (ca. 0,03 ml) av testrøde blodlegemer i nærheten.
  4. Bland to dråper med en steril pinne.
  5. Etter 10 - 15 sekunder, vipp platen forsiktig i 20 - 30 sekunder.
  6. Sjekk for agglutinasjon tre minutter etter blanding.

I tilfelle en reaksjon blir blodet vurdert som Rh-positivt (Rh +), i fravær av en reaksjon - som Rh-negativt (Rh-). Ved negativ eller svak agglutinasjon er det nødvendig å gjennomføre studien på nytt med ufullstendige anti-D IgG-antistoffer for å identifisere et svakt eller delvis antigen D.

Metode for å bestemme Rh-faktoren D u i en prøverørstest

Parallelt med analysen utføres tre kontrollprøver: tsoliklon Anti-D (anti-D IgG) reagens med standard Rh-positive og Rh-negative erytrocytter, analyserte erytrocytter med gelatinløsning uten anti-D IgG diagnosticum.

  1. Plasser i et prøverør 0,05 - 0,1 ml (en dråpe) erytrocytter fra en koagulert blodpropp eller vaskes fra et konserveringsmiddel.
  2. Tilsett 0,1 ml (to dråper) 10% gelatin oppvarmet til flytende ved 45 - 50 ° C..
  3. Tilsett en dråpe anti-D (anti-D IgG) tsoliclon.
  4. Blande.
  5. Inkuber røret i et vannbad i 10-15 minutter eller i en inkubator ved 48 ° C i en halv time.
  6. Tilsett 5-6 ml isoton løsning.
  7. Snu røret 1-2 ganger.
  8. Vurdere tilstedeværelsen av agglutinasjon i overført lys.

Mangelen på resultater av reaksjonen med anti-D IgM og uttalt agglutinasjon med anti-D IgG indikerer påvisning av svake former for antigen D. I tilfelle mild agglutinasjon, bør studien gjentas i den indirekte Coombs-testen.

Bestemmelse av Rh-tilknytning til et standard universalreagens

Standard reagens antiresus Rh0D inneholder polyklonale ufullstendige anti-D-antistoffer. Parallelt med analysen av prøven utføres en kontrollstudie av Rh-reagenset0D med standard Rh-positive (enkeltgruppe eller gruppe 0) og Rh-negative (enkeltgruppe) erytrocytter.

  1. Plasser en dråpe Rh diagnosticum på bunnen av røret0D.
  2. Tilsett en dråpe analyserte røde blodlegemer.
  3. Rist røret flere ganger.
  4. Vipp røret til nesten vannrett og vri sakte i minst 3 minutter. Å spre innholdet langs veggene vil gi et mer uttalt reaksjonsresultat. Vanligvis skjer agglutinasjon de første 60 sekundene. Det trengs tid for å oppdage et svakt antigen D u.
  5. Tilsett 2-3 ml isoton NaCl-oppløsning og vend røret 2-3 ganger uten å riste.
  6. Vurder visuelt tilstedeværelsen av agglutinasjon. Uttalte flak mot bakgrunnen av en klar løsning indikerer tilstedeværelsen av antigen D. En jevn farget væske indikerer fravær av antigen.

Resultatet betraktes som pålitelig bare etter kontroll av kontrollprøvene: utbruddet av en reaksjon med standard Rh-positiv og ingen reaksjon - med Rh-negative erytrocytter.

For informasjon om trinnvis formulering av den indirekte Coombs-testen ved bruk av ufullstendige anti-D-antistoffer, se delen "Coombs-reaksjon" på nettstedet.

For Mer Informasjon Om Diabetes